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    豬瘟病毒抗體檢測試劑盒

    更新時間:2016-11-06

    簡要描述:

    豬瘟病毒抗體檢測試劑盒的服務和業務在同行獲得*好評,其立足于生命科學領域,全力打造高品質生物科技產品鏈和技術服務鏈,也具備豐富的管理經驗,同時我們建立了集、售后服務等多方位的服務體系,有激情、有理想,更有責任感,是您科研道路上值得信賴的伙伴。

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    豬瘟病毒抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)使用說明書

    【產品名稱】
    通用名:豬瘟病毒抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
    英文名:Test Kit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus (ELISA)
    【包裝規格】 96T×1/盒、96T×2/盒
    【預期用途】 豬瘟是由豬瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起的豬的一種高度接觸性、出血性和致死性傳染病,其特征為高熱稽留和微血管壁變性而引起的廣泛出血、壞死、梗塞等,慢性以纖維素壞死性腸炎為特征。
    本試劑用于檢測豬血清中豬瘟病毒抗體,可用于豬瘟病毒疫苗免疫效果評價。
    【原    理】
        本試劑盒系由預包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬瘟病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經溫育后若樣品中含有豬瘟病毒抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變為;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬瘟病毒抗體。
    【試劑盒組成】 

    序號

    名稱

    規格(96T×1)

    規格(96T×2)

    1.

    酶標板

    96T×1

    96T×2

    2.

    酶標記物  (紅蓋)

    11ml×1

    11ml×2

    3.

    抗體工作液 (藍蓋)

    5.5ml×1

    11ml×1

    4.

    20X濃縮洗滌液

    40ml×1

    40ml×1

    5.

    底物液A  (白蓋)

    6ml×1

    11ml×1

    6.

    底物液B  (黑蓋) 

    6ml×1

    11ml×1

    7.

    終止液  (黃蓋) 

    6ml×1

    11ml×1

    8.

    陽性對照  (紅蓋)

    1.0 ml×1

    1.5 ml×1

    9.

    陰性對照  (綠蓋)

    1.0 ml×1

    1.5 ml×1

    10.

    蓋板膜

    1張

    2張

    11.

    自封袋

    1個

    1個

    12.

    說明書

    1份

    1份

     

    【儲存及有效期】 儲存于陰涼干燥處(2-8℃),有效期期12個月。
        包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
    【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標儀,37℃恒溫設備,可調微量移液器。
    【樣品準備】
    1.取動物全血按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
    2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
    3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
    【檢驗方法】
    1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
    2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
    3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
    4.混勻,置37℃反應30分鐘。
    5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。
    6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。
    7.洗滌,同步驟5。
    8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。
    9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
    【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照≤0.10,陽性對照≥0.6。
    【檢驗結果的解釋】
    1.樣品A值≥0.38為陽性;樣品A值在0.2到0.38之間為可疑;樣品A值<0.2為陰性。
    2.本實驗結果為陰性或可疑時表明豬只抗體水平不足,建議補打相應疫苗。
    【試驗方法的局限性】
        該試驗僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬瘟病毒抗體,根據A值高低可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。
    【注意事項】
    1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴格健全和執行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。
    2.終止液具有腐蝕性,應避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
    3.酶標板從冷藏環境中取出時應恢復至室溫方可開袋,未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
    4.濃縮洗滌液在低溫時容易結晶,使用時需恢復至室溫以*溶解。
    5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
    6.用于檢測的樣品應保持新鮮。
    7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數為準。
    8.不同批號試劑組分不得混用。

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